宣稱30分鐘甚至是15分鐘內(nèi)可實現(xiàn)快速檢測的試劑

大多是犧牲了部分性能來換取速度的提升

2020年2月3日，江蘇省某生物科技公司，生產(chǎn)人員進行試劑成品包裝。?中新社發(fā)? 湯德宏 攝

自新冠疫情發(fā)生以來，受試劑盒和實驗室數(shù)量等因素的限制，武漢大量疑似患者無法確診。近日，武漢對所有疑似患者進行核酸檢測“清零”，檢測能力從最初每日200份，提升至每日8000份。疫情當下，大量疑似患者、無癥狀感染者等待排查診斷，使得相關檢測產(chǎn)品需求急迫。

2月8日，科技部發(fā)布《新型冠狀病毒(2019-nCoV)現(xiàn)場快速檢測產(chǎn)品研發(fā)應急項目申報指南的通知》（簡稱《指南》），旨在突破現(xiàn)有檢測技術對人員、檢測場所等條件的限制，提升加快檢測效率和便捷性，有利于對疑似患者的快速診斷和密切接觸人群的現(xiàn)場篩查。

此次科技部征集的應急快檢產(chǎn)品，均要求一至兩周內(nèi)完成產(chǎn)品研發(fā)，最晚一個半月取得臨床證書，并列出了相關考核指標。

一個咽拭子樣本，放入一臺POS機大小的小型核酸檢測儀中，按下啟動鍵，半個小時后就能出檢測結果。現(xiàn)場快速檢驗（POCT）又被稱為“床邊檢測”，依賴便攜式的儀器和試劑，海關防疫檢測人員、基層疫情防控人員和一些社區(qū)工作者，在采樣現(xiàn)場就能對疑似病例進行快速初篩。

相比于實時熒光PCR（聚合酶鏈式反應）檢測的復雜流程，POCT可以脫離實驗室，也不需要穿著三級防護服的醫(yī)療器械創(chuàng)新網(wǎng)小心翼翼操作，只要按照說明書，一個經(jīng)過短暫培訓過的普通檢驗人員或護士也可以完成。整個檢測流程至少可以節(jié)省3~4個小時。成功地快速初篩，將為全國上下的分級診療打下重要的基礎。

本次科技部征集的新型冠狀病毒現(xiàn)場快速檢測產(chǎn)品主要有三種，分別是核酸現(xiàn)場快速檢測設備及試劑、抗原快速檢測試劑和抗體快速檢測試劑。

一位專門從事核酸檢測的國家重點實驗室研究員告訴《中國新聞周刊》，核酸現(xiàn)場快速檢測和實時PCR的技術原理是相同的，也就是基因擴增，先將新冠病毒的一段RNA片段逆轉錄成雙鏈DNA，再通過DNA聚合酶進行擴增，將攜帶病毒的基因片段不斷放大，然后通過一種熒光探針來捕捉，當擴增后的病毒濃度達到一個臨界值時，就會產(chǎn)生熒光信號，意味著樣本中被檢測出攜帶新冠病毒。

前述研究員指出，和實驗室內(nèi)的傳統(tǒng)PCR檢測相比，一體化現(xiàn)場快速檢測雖然便攜、操作簡單，但如果過于強調其“快速”的特性，其敏感度可能會受影響。例如，在本次《指南》列出的核酸快速檢測產(chǎn)品考核指標中，規(guī)定與傳統(tǒng)實時熒光PCR試劑相比，檢出率（靈敏度）要不低于95%。“這相當于，人為的降低了對它靈敏度的要求，理論上，核酸快速檢測應該和實時熒光PCR的靈敏度相同。”該研究員說。

另外，核酸現(xiàn)場快速檢測一次能檢測的樣本量很有限，少的可能7~8份，多的也就十幾份。而在實驗室中使用的PCR儀，一般每次可以檢測96個樣本，多的可以達到384份。

與核酸現(xiàn)場快速檢測不同，抗原快速檢測試劑和抗體快速檢測試劑都屬于免疫檢測，通過采集患者的血清，利用病毒抗原和抗體相結合的原理。抗體檢測是用抗體檢測出病人體內(nèi)是否有病毒的抗原。抗原檢測是用病毒抗原來檢測病人體內(nèi)是否激發(fā)了特異性的抗體。

一位疾控系統(tǒng)專門研究核酸檢測的專家對《中國新聞周刊》指出，免疫檢測比核酸檢測要快，前者通常只需15~30分鐘即可出結果，但靈敏度不如核酸檢測。比如，《指南》的考核標準中就寫明，對抗原快速檢測試劑的要求是，檢出率可達到核酸檢測的80%以上。相當于核酸檢測可以檢測出100個陽性樣本，抗原檢測只要求檢出80個。“實際上，這個目標也并不容易實現(xiàn)，”這位專家感慨道。

前述研究員也稱，在技術層面上，同樣是對病毒基因片段的擴增，核酸可以放大到100萬倍以上，遠遠大于免疫的放大效果。這意味著，免疫檢測雖快，但對低濃度病毒的樣本檢出率低，易造成漏檢。

另外，和實時熒光PCR相比，抗原檢測的特異性較差，會造成假陽性的情況。此前，浙江一家醫(yī)療器械企業(yè)采用“膠體金法”，研發(fā)出一種可快速篩查冠狀病毒的檢測試紙，可十分鐘出結果。該產(chǎn)品的研發(fā)人員就指出，這種試紙是針對冠狀病毒的廣譜性初篩，并不只是針對新冠病毒。

“任何針對基因片段的檢測都是最直接的，而免疫的檢測是間接的，”前述專家說。

多位專家告訴《中國新聞周刊》，無論是現(xiàn)場快速檢測還是實驗室內(nèi)需要配合儀器的實時PCR檢測，在現(xiàn)有技術條件下，時間的縮短一般都要在一定程度上犧牲靈敏度。也就是說，更容易出現(xiàn)假陰性的情況。

近日，山東、上海、天津等省市的一些醫(yī)療器械企業(yè)，相繼推出可在半小時內(nèi)檢出的新型冠狀病毒檢測試劑盒。據(jù)了解，相關試劑盒已進入國家藥監(jiān)局的應急審批通道。

前述專門從事核酸檢測的國家重點實驗室研究員告訴《中國新聞周刊》，目前，實時熒光PCR檢測最快需要1~1.5小時。因為，提取核酸的時間最快也要30~40分鐘，擴增至少要40~60分鐘。

另一位試劑盒生產(chǎn)企業(yè)的技術專家也對《中國新聞周刊》坦言，宣稱30分鐘，甚至是15分鐘內(nèi)可以實現(xiàn)快速檢測的試劑，大多是犧牲了部分性能來換取速度的提升。

前述疾控專家指出，對分子基因診斷技術而言，特異性和靈敏性永遠需要去平衡。特異性強，靈敏度就相對差一些；靈敏度好，特異性就會被削弱。不同的靶位、引物和探針的選取，甚至反應體系的設計都是為了更好的平衡這兩種特性。

在他看來，從技術的角度來說，在靈敏度和特異性的平衡上，相較一些快速檢測辦法，目前平衡的最好的仍是實時熒光PCR檢測試劑盒。從過往的重大疫情來看，無論是西非埃博拉病毒、甲流還是中東呼吸綜合征（MERS），熒光定量PCR仍是國家首推的檢測方式。

中國疾控中心主任高福指出，目前只有核酸試劑應用于新型冠狀病毒感染病例的診斷，抗體檢測試劑的研發(fā)時間比核酸檢測試劑周期要長。目前，已經(jīng)有多家抗體檢測研究機構接近臨床試驗完成階段。但他強調，要加快驗證抗體檢測試劑盒能否在發(fā)病早期檢測到免疫球蛋白M抗體。

北京大學第一醫(yī)院呼吸和危重癥醫(yī)學科主任王廣發(fā)也表示，如果發(fā)現(xiàn)快速檢測在臨床上的結果和預料中有一定差距，就要分析在什么情況下更適合使用快速檢測，什么時候需要再做實時PCR進行驗證。這樣會有一個非常好的效應是，可以大大減少送檢實驗室的壓力，實驗室的壓力會大幅度減輕。

“未來，幾種類型試劑結合，取長補短，一定會進一步提高新型冠狀病毒肺炎病例的檢出率。”高福說。